极端耐热木聚糖酶基因在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 毛忠贵 薛业敏 邵蔚蓝
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 学科: 生物学
• 关键词: 木聚糖酶基因 高效表达 诱导条件优化
• 年，卷（期）: 2003,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 20-25
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 4748字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-990X.2003.11.005

摘要

海栖热袍菌Thermotoga maritima为嗜极端高温的厌氧细菌,其产生的极耐热性木聚糖酶B具有非常可观的工业应用前景.但编码该酶的基因xynB在大肠杆菌中的表达较困难.文中利用PCR技术将xynB克隆至原核表达载体pET-20b,并与组氨酸标签进行融合构建成重组质粒pET-20-xynB.研究发现,pET-20-xynB在稀有密码子AGA,AGG和AUA得到加强的大肠杆菌宿主菌株BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中,木聚糖酶基因的表达水平远远高于在其他菌株中的表达.结合对重组菌的诱导条件的优化,使得重组蛋白表达量达到11.5%,比酶活达到25.69U/mg,比常规基因工程菌株提高12.5倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵蔚蓝	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	54	772	16.0	25.0
2	毛忠贵	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	175	1381	18.0	29.0
3	薛业敏	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	14	254	10.0	14.0