缺失nifE的棕色固氮菌突变种MoFe蛋白的纯化及体外激活

• 作者: 吕玉兵 汪志平 潜中兴 赵剑峰 赵颖 黄巨富
• 来源期刊: 植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: △nifE Av1 纯化 激活和体外组装 FeMoco和含Mn重组液
• 年，卷（期）: 2003,（7）
• 所属期刊栏目: 发育与分子生物学
• 页码范围: 815-819
• 页数: 5页
• 分类号: Q945
• 字数: 2456字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-9072.2003.07.010

摘要

经DEAE纤维素、Sephacryl S-300和Q-Sepharose柱层析分离纯化,从缺失nifE的棕色固氮菌(Azotobactervinelandii Lipmann)突变种(DJ35)的无细胞粗提物中得到△nifE MoFe蛋白(△nifE Av1).SDS凝胶电泳分析表明,△nifE Av1的亚单位种类和分子量分别与棕色固氮菌野生型(OP)MoFe蛋白(Av1)的α和β亚单位相似.当与固氮酶Fe蛋白(Av2)活性互补时,△nifE Av1不具有还原质子的能力,但从OP Av1中抽提的FeMoco却可使其激活.经过量的邻菲啰啉(o-phen)厌氧处理并经Sephadex G-25柱层析分离后,便得到△nifE Av1 .在同时存在Av2和MgATP发生系统的条件下,△nifE Av1 ,而不是△nifE Av1,可为由KMnO4、高柠檬酸铁、Na2S、Na2S2O4和二硫苏糖醇组成的含Mn重组液(RS-Mn)显著激活.但在缺少MgATP或Av2的条件下,RS-Mn则不能激活△nifE Av1 .这就表明,RS-Mn对△nifE Av1 的激活需要o-phen的预先处理及同时存在Av2和MgATP的这二个条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵颖	中国科学院植物研究所光合与环境分子生理学重点实验室	74	571	13.0	19.0
2	汪志平	浙江大学原子核农业研究所	28	339	11.0	17.0
3	吕玉兵	中国科学院植物研究所光合与环境分子生理学重点实验室	9	65	6.0	7.0
4	黄巨富	中国科学院植物研究所光合与环境分子生理学重点实验室	10	64	5.0	7.0
5	赵剑峰	中国科学院植物研究所光合与环境分子生理学重点实验室	5	25	4.0	5.0
6	潜中兴	中国科学院植物研究所光合与环境分子生理学重点实验室	1	4	1.0	1.0