人睾丸肿瘤抗原MAGE-E1基因的克隆测序及在原核系统中的表达

• 作者: 张丰 李青 樊代明 王莉 郭斌 郭爱林
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: MAGE-E1 基因克隆 序列测定 基因表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 380-382
• 页数: 3页
• 分类号: R730.231
• 字数: 2643字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2003.05.009

摘要

目的扩增及克隆人的MAGE-E1基因并利用大肠杆菌进行表达.方法从人胶质瘤细胞系BT-325中提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-E1基因片段.将MAGE-E1基因片段插入载体pGEM-T easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGEX-4T-2中,构建重组表达载体pGEX-4T-2-MAGE-E1,并转化大肠杆菌进行表达.结果1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5 h,MAGE-E1蛋白表达即达高峰,SDS-PAGE及凝胶密度扫描分析表明,表达出Mr约41 000大小的蛋白,占菌体总蛋白的35%.结论成功扩增、克隆MAGE-E1基因,并在大肠杆菌中得到稳定高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李青	第四军医大学西京医院病理科	138	696	13.0	20.0
2	樊代明	第四军医大学西京医院消化内科	268	1902	21.0	30.0
3	张丰	第四军医大学西京医院病理科	32	123	5.0	8.0
4	王莉	第四军医大学西京医院病理科	124	754	16.0	21.0
5	郭爱林	第四军医大学西京医院病理科	23	115	6.0	9.0
6	郭斌	第四军医大学研究生院	10	59	5.0	7.0