胰腺癌反义K-ras癌基因片段的分离和克隆

• 作者: 刘训良 卢春 徐泽宽 戴存才 曾怡 苗毅 蒋奎荣 黄丽
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺肿瘤 逆转录病毒表达载体 反义 K-ras癌基因 克隆
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 554-557
• 页数: 4页
• 分类号: R735.9
• 字数: 3134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2003.06.011

摘要

目的:分离及克隆胰腺癌基因组中K-ras基因片段,构建重组反义K-ras癌基因逆转录病毒载体,并探讨其意义.方法:设计2对PCR引物,分别在上下游引物中引进BamHI和EcoR I位点,以胰腺癌细胞株BxPC-3基因组DNA为模板扩增K-ras基因外显子1及侧翼序列,并采用重组DNA技术将目的基因插入逆转录病毒载体LZRSpBMN-Z中,并经菌液PCR和限制性内切酶酶切鉴定.结果:K-ras基因外显子1及侧翼序列已成功地克隆人LZRSpBMN-Z中.结论:LZRSpBMN-Z是胰腺癌反义基因治疗中新型候选载体之一.应用PCR方法获取反义K-ras目的基因外显子1方便可行,可用于重组反义K-ras癌基因逆转录病毒载体的构建.