K562细胞cDNA表达文库的构建和鉴定

• 作者: 付杰 刘新平 张王刚 李福洋 药立波 陈刚
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 白血病 K562细胞 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 109-111
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2003.02.004

摘要

目的构建K562细胞表达型cDNA文库.方法提取K562细胞总RNA,分离mRNA,反转录合成双链cDNA,消平cDNA末端,连接EcoRⅠ适配子,磷酸化EcoR Ⅰ适配子5'端,Sephacryl-S400柱除去小于400 bp cDNA片段,与去磷酸化的λ gt11噬菌体连接,体外包装后建成cDNA文库.取出1 μL倍比稀释感染E.coli Y1090,测定文库大小、重组率,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小.结果构建成含1.02×106重组子的K562细胞cDNA文库,重组子平均插入外源片段长约1.3 kb.结论所建文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	药立波	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	160	1030	16.0	24.0
2	李福洋	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	22	85	6.0	8.0
3	刘新平	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	133	841	16.0	23.0
4	张王刚	西安交通大学第二医院血液内科	162	851	14.0	20.0
5	陈刚	西安交通大学第二医院血液内科	95	591	13.0	20.0
6	付杰	西安交通大学第二医院感染科	5	15	2.0	3.0