用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA制备方法的比较

• 作者: 剧海 张镜宇 梁东春 郭刚
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 毕赤酵母 DNA 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 270-272
• 页数: 3页
• 分类号: R58
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2003.05.002

摘要

目的:比较4种用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA的制备方法,以寻求一种稳定、简便的DNA模板制备方法,用于毕赤酵母重组子的分析.方法:分别用玻璃珠法、煮沸法、煮-冻-煮法以及直接法制备毕赤酵母基因组DNA模板,在相同条件下进行PCR扩增并比较其差异.结果:煮-冻-煮法与玻璃珠法制备的模板进行PCR均可取得理想的实验结果.以煮沸法制备模板作PCR时结果受所用模板浓度的影响很大,稳定性较差.直接法(即直接用未经处理的菌体作模板)的PCR结果随机性较大,实验结果最不理想.结论:煮-冻-煮法所需时间少、费用低、操作简便而且结果稳定,是采用毕赤酵母表达系统进行PCR鉴定时制备模板DNA的首选方法.