一种新型兔源内毒素结合蛋白的分离纯化及体外生物活性的初步研究

• 作者: 刘友生 周萍 潘峰 王晓东 葛晓冬
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内毒素类 载体蛋白质类 脂多糖类 离子交换 色谱法,凝胶 肿瘤坏死因子
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 42-46
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 4528字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2003.01.013

摘要

目的分离纯化一种新型的内毒素结合蛋白,并初步观察其生物学特性.方法建立兔烧伤合并内毒素血症模型,采其血清,经二步离子交换层析及凝胶过滤分离纯化,并经流式细胞仪分析、绵羊红细胞凝聚试验、氨基末端氨基酸残基测序等方法鉴定.将所获蛋白质作用于体外培养的人单核细胞(U937),观测其分泌TNFα等细胞因子的状况.结果所获蛋白质的分子量为48kDa(48×103),其N端10个氨基酸序列为GSQGTFTSEE,与美国国立图书馆蛋白质库中有关兔的氨基酸序列进行比较,未发现相同序列,暂命名为P48.它具有与内毒素结合蛋白相似的功能,能促进极低浓度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)与外周血单核细胞(PBMC)结合,并促进U937分泌TNFα.结论从兔血清中能够分离纯化出带有生物学活性的新型内毒素结合蛋白P48,它具有与脂多糖结合蛋白(lipoplysaccharide binding protein,LBP)相似的生物学活性,并可促进炎症反应的发生.