猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立及其初步应用

• 作者: 刘湘涛 孙世琪 尚佑军 谢庆阁 郭慧琛 靳野 韩雪清 马军武 魏旭文
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟 RT-PCR ELISA 分子诊断
• 年，卷（期）: 2003,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 3-6
• 页数: 4页
• 分类号: S852.651
• 字数: 2370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2003.09.001

摘要

建立了检测CSFV的快速、敏感、特异的RT-PCR ELISA方法.在RT-PCR过程中以地高辛标记的dUTP(DIG-dUTP)标记PCR产物,用生物素标记的捕获探针在链亲和素包被微量板孔中杂交捕获PCR产物.该方法的敏感性较常规RT-PCR方法高100倍,可检测出350μL 1∶100(相当于3.5mg)的兔脾组织悬液中的C株CSFV,特异性强,避免了PCR过程中因污染导致的假阳性结果.通过对RT-PCR和微量杂交系统的条件优化,该方法用于检测C株兔脾组织毒、细胞适应毒和野毒感染的猪组织毒样品,效果良好.