利用谷胱甘肽S转移酶表达标签捕获系统性红斑狼疮相关基因IFIT1的相互作用蛋白质

• 作者: 华晶 叶霜 庞海 沈南 钱捷 陈兴国 陈顺乐 顾越英 饶子和
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 红斑狼疮,系统性 干扰素诱导蛋白 蛋白质结合
• 年，卷（期）: 2003,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 770-773
• 页数: 4页
• 分类号: R593
• 字数: 3822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2003.09.019

摘要

目的试图运用蛋白组学的策略研究系统性红斑狼疮(SLE)相关的干扰素诱导蛋白IFIT1的蛋白质相互作用,以揭示其可能的功能.方法应用荧光实时定量PCR进一步验证SLE患者外周血白细胞转录水平IFIT1基因的表达;应用分子克隆技术在大肠杆菌克隆并表达谷胱甘肽S转移酶(GST)-IFIT1融合蛋白;利用GST表达标签,以GST-IFIT1为饵蛋白捕获SLE外周血白细胞蛋白裂解物中与IFIT1存在相互作用的蛋白质,MALDI-TOF-MS肽指纹图谱进行蛋白质鉴定.结果荧光实时定量PCR证实IFIT1基因确在SLE(40例)较正常对照(29例)表达上调(P＜0.001).克隆表达了GST-IFIT1融合蛋白,并捕获到一个与IFIT1存在相互作用的蛋白质,经肽指纹图谱初步鉴定为Rho/Rac鸟嘌呤核苷交换因子.结论IFIT1是SLE新的相关基因.运用蛋白组学的策略研究IFIT1蛋白质水平的相互作用显示,IFIT1与Rho/Rac鸟嘌呤核苷交换因子存在相互作用,IFIT1可能通过该途径影响Rho蛋白的活化,参与SLE的发病.