表型遗传修饰对人结肠癌细胞周期和抑癌基因表达的调控

• 作者: 房静远 朱红音 杨丽 沈冠凤 童菊芳 罗鸿妤 萧树东 邱德凯 陆娟 陈萦晅
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 肿瘤细胞,培养的 基因表达调控,肿瘤 DNA甲基化 组蛋白乙酰化
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2003.02.002

摘要

目的分析和探讨同一结肠癌细胞系DNA甲基化和组蛋白乙酰化对抑癌基因表达和细胞周期的影响.方法培养结肠癌细胞HT-29、SW1116和Colo-320,分别以去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)和(或)组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂trichostatin A(TSA)及丁酸盐干预细胞.提取基因组DNA和RNA,部分行甲基化特异性PCR(MSP)检测p16INK4A基因启动子区甲基化情况;以RT-PCR研究p16INK4A和p21WAFImRNA表达水平;同时以流式细胞仪分析SW1116和Coll-320细胞周期.结果干预前,HT-29、SW1116和Colo-320三种结肠癌细胞系中均有较弱的p16INK4A表达;SW1116和Colo-320细胞的p21WAF1表达缺如.对于HT-29细胞,1 μmol/L的5-aza-dC干预24 h后,p16INK4A基因启动子区甲基化水平明显降低而mRNA水平显著增高,10 μmol/L干预时则无显著改变.在SW1116和Colo-320细胞中,5-aza-dC干预后p16INK4A表达增强,且以10 μmol/L或5 μmol/L浓度干预24 h者为最明显,相反p21WAFI仍无明显表达.该两个细胞系经TSA或丁酸盐处理后,p21WAF1转录水平显著上调.另外,该两个细胞系中,5-aza-dC并不能改变细胞周期,而TSA或丁酸盐使细胞阻滞于G1期.结论三种人结肠癌细胞中,p16INK4A基因的表达均受甲基化调节.SW1116和Colo-320细胞中p21WAF1基因表达主要受乙酰化调节,在该两个细胞系中,乙酰化使细胞周期停滞于G1期.