肝癌细胞冻融抗原负载树突状细胞瘤苗的制备与活化

• 作者: 区庆嘉 褚忠华 闵军 陈涛 高维实 魏菁
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 肝癌 肿瘤抗原 疫苗
• 年，卷（期）: 2003,（9）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1279-1282
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 4228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2003.09.034

摘要

目的:探讨制备肝癌树突状细胞(DCs)瘤苗和体外诱导DCs活化的优化方法.方法:取健康人新鲜血50 mL,Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC),制备肝癌细胞冻融抗原,采用不同因子组合培养PBMC,诱导和激活DCs,A组:rhGM-CSF+IL-4;B组:rhGM-CSF+IL-4+冻融抗原负载;C组:rhGM-CSF+IL-4+TNF-α;D组:rhGM-CSF+IL-4+TNF-α+冻融抗原负载.结果:各组均诱导出DCs,并高表达CD11c和CD54,冻融抗原可明显上调CD86、CD80、HLA-DR表达和IL-12 p40分泌(P＜0.01),TNF-α促进CD86表达的作用更显著,但对IL-12分泌无影响,依次用TNF-α诱导和冻融抗原负载可进一步促进CD86表达和IL12 p40分泌(P＜0.05).CD54和HLA-DR双标记免疫细胞化学染色显示,各组DCs大多为CD54+.表达HLA-DR的DCs均为CD54+HLA-DR+,其中,A组CD54+HLA-DR+细胞数量最少,D组最多,平均每个细胞HLA-DR的表达水平也与此对应.结论:采用rhGM-CSF、IL-4诱导的未成熟DCs,依次使用TNF-α刺激与肝癌细胞冻融抗原修饰可有效促进DCs的活化与成熟.