改造的腺病毒5型E1A基因对TNF-α诱导的猪血管内皮细胞中NF-κB活性的抑制作用

• 作者: 刘玉英 周小山 李艳春 杨军 王争 赵清正 马业伟 高新
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 延缓性免疫排斥反应 E1AΔ 猪血管内皮细胞 NF-κB E-选择素
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 48-51
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 3707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2003.01.013

摘要

在延缓性免疫排斥反应(DXR)过程中, NF-κB发挥着关键作用. 如何恰到好处地抑制其活性是本领域研究的重要问题之一. 用改造的E1A基因(E1A)包括功能区(1 ~ 80氨基酸)和核定位区(139 ~ 243氨基酸), 删除其中可能对人体有害的CR2区, 将其克隆到真核表达载体pcDNA3中, 并转染猪血管内皮细胞(PAEC), 经G418筛选, 获得稳定表达细胞株. RT-PCR技术和细胞生长曲线分析, 证明E1AΔ基因能在PAEC中稳定表达, 且不影响细胞的正常生长, 并能抵抗肿瘤坏死因子-α (TNF-α)诱导的细胞凋亡. 报告基因分析表明, E1A(能抑制由TNF-α诱导的NF-κB活性, 其抑制率为53%, 对NF-κB信号转导途径下游的一个重要炎症基因--E-选择素基因的表达抑制率达63%. 综上, E1AΔ基因的这些功能基本符合异种器官移植中克服DXR的要求, 为利用E1AΔ基因克服DXR的可行性提供了实验依据.