γ射线照射前后IEC-6细胞蛋白质组的差异分析

• 作者: 刘晓宏 王锋超 程天民 章波 粟永萍 艾国平 魏永江
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 电离辐射 肠上皮细胞 双向电泳 肽质量指纹图谱分析
• 年，卷（期）: 2003,（24）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 2157-2160
• 页数: 4页
• 分类号: R394.3|Q345
• 字数: 3058字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2003.24.001

摘要

目的分析γ射线照射后肠上皮细胞系(IEC-6)细胞蛋白质组的改变.方法分别提取正常IEC-6细胞和经过25 Gy照射后细胞的蛋白样品,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术进行分离,考马斯亮蓝染色后经PDQuest软件分析双向电泳图谱,对部分差异的蛋白点进行胶内酶切、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其肽质量指纹图谱,在网上检索数据库鉴定差异蛋白,并采用RT-PCR间接证实其变化.结果获得了较好的双向电泳图谱.图像分析显示:在正常IEC-6细胞中检测到(608±39)个蛋白质点,细胞照射后的样品中检测到(595±31)个蛋白质点,其中匹配的蛋白点为396个.对表达差异的16个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析,经数据库检索后初步鉴定为一些与代谢、自由基清除、细胞骨架相关的蛋白.RT-PCR证实了ERP29基因在照射后增强.结论电离辐射可以诱导IEC-6细胞蛋白质组发生改变.