摘要:
目的:观察HSV-tk/ACV(Herpes Simplex Virus thymidine kinase gene/Acyclovir)系统基因治疗恶性肿瘤过程中旁观者效应的作用.方法:HSV-tk基因重组逆转录病毒载体转染PA317细胞为PA317-tk细胞.培养PA317-tk细胞即可获得有感染力的携带HSV-tk基因的病毒颗粒,然后转染肝癌细胞株SMMC-7721细胞为SMMC-tk细胞.SMMC-TK细胞与SMMC-7721细胞以不同百分比混合,用ACV(100ug/ml)培养基培养,MTT法检测ACV对各组细胞抑制率(Inhibit Rate,IR),根据各组IR与该组SMMC-tk细胞数的百分比值(IR/SMMC-tk%,IR/St)的大小判断旁观者效应作用的有无和强弱.结果:旁观效应试验表明,含SMMC-tk细胞10%,20%,30%,40%,50%,60%,70%,80%,90%,100%各组IR/St比值分别为2.15,1.91,1.83,1.47,1.30,1.11,1.02,0.93,0.84,0.76.10%~70%各组IR/St比值均大于1,存在明显旁观者效应,以10%,20%,30%,40%组最强,80%~100%三组IR/St比值小于1,旁观者效应不明显.结论:研究结果证实用HSV-tk/ACV系统基因治疗恶性肿瘤,适宜比例TK+细胞时,存在明显的旁观者效应,TK/细胞为10%时旁观者效应最强,这对于HSV-TK/ACV系统基因治疗恶性肿瘤具有重要意义.