人p58.2重组逆转录病毒载体的构建及稳定包装细胞系的鉴定

• 作者: 曹东林 李江琪 郭坤元
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: p58.2基因 逆转录病毒载体 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 239-241
• 页数: 3页
• 分类号: R45
• 字数: 2709字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2003.03.008

摘要

目的构建并鉴定携带人p58.2基因的重组逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系.方法用PCR技术从pSPORT1-p58.2扩增出编码p58.2N端1～345个氨基酸的全长基因,定向克隆入逆转录病毒载体pMSCVneo中,酶切鉴定;脂质体法将重组逆转录病毒转入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株.结果双酶切鉴定,成功构建重组逆转录病毒载体;重组逆录病毒载体转入包装细胞,经G418筛选,形成了抗性克隆,并测得病毒滴度为3×105 cfu/ml,提示构建携带人p58.2基因的逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系成功.结论构建人p58.2基因的逆转录病毒载体可行,并且可望成为一种很好的对血液系统疾病进行基因治疗的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭坤元	第一军医大学珠江医院血液科	61	278	8.0	13.0
2	李江琪	第一军医大学珠江医院血液科	16	58	4.0	7.0
3	曹东林	第一军医大学珠江医院血液科	8	32	3.0	5.0