反转录巢式PCR方法检测SARS冠状病毒

• 作者: 宋艳斌 张宝 王洪敏 王艳 肖维威 郑文岭 马文丽 马晓冬 黄海
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 反转录巢式PCR
• 年，卷（期）: 2003,（z1）
• 所属期刊栏目: 病原学专题
• 页码范围: 11-13
• 页数: 3页
• 分类号: R511
• 字数: 2237字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2003.z1.004

摘要

目的探索SARS冠状病毒早期诊断的有效手段.方法对临床病例样品采用反转录巢式PCR方法鉴定SARS冠状病毒.提取样品RNA,用巢式PCR外侧下游引物进行反转录,以反转录产物为模板,进行巢式第1次、第2次PCR.PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行测序鉴定.结果被检样品扩增出特异片段,经测序验证确实来自SARS相关冠状病毒.Blast比较结果与SARS冠状病毒多伦多株相应片段只有一个碱基的差异.结论反转录巢式PCR方法验证在非典型肺炎患者标本中存在SARS相关冠状病毒的序列,证实该法不失为一种检测SARS冠状病毒的快速、简便、易行的方法.