造血干细胞移植中HLA-A、B、C基因分型影响因素的探讨

• 作者: 刘楠 奚永志 孙玉英 崔建武 梁飞 郭斯启
• 来源期刊: 中华实用医学
• 学科: 医学
• 关键词: HLA-A、B、C 基因分型 造血干细胞移植
• 年，卷（期）: 2003,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16
• 页数: 3页
• 分类号: R4
• 语种: 中文

摘要

目的:为提高造血干细胞移植供-受体HLA-Ⅰ类配型的准确度、特异性和分辨率,对HLA A、B、C位点基因分型的影响因素进行探讨.方法:分别采用2%EDTA钠盐、钾盐和肝素抗凝血标本,提取200例造血干细胞移植供-受体的外周血 DNA,采用美国PEL-FREEZ微量SSPTMHLA-Ⅰ类分型试剂盒对该200例标本进行基因分型,并对其影响因素进行分析.结果:2%EDTA钠盐抗凝血标本扩增效果好于2%EDTA钾盐抗凝和肝素抗凝.DNA浓度范围为25-200ng/μl,最佳浓度为100ng/μl,A260/A280比例在1.65-1.80之间.溴化已锭(EtBr)浓度为0.2-0.5μg/ml,EtBr量不足将导致无反应带或反应带变弱,EtBr量过多使凝胶本底偏高,影响阳性带的判定.DNA Tag酶的最终反应浓度为0.05U/μ l,其活性的高低将直接影响反应结果.结论:确立了HLA-A、B、C位点基因分型PCR-SSP的最佳实验条件,必将提高临床造血干细胞移植供受体HLA-Ⅰ类配型的准确度、特异性和分辨率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	奚永志	军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫分析实验室	45	159	6.0	11.0
2	刘楠	军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫分析实验室	45	138	7.0	9.0
3	孙玉英	军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫分析实验室	20	54	4.0	6.0
4	梁飞	军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫分析实验室	5	12	2.0	3.0
5	郭斯启	军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫分析实验室	4	1	1.0	1.0
6	崔建武	军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫分析实验室	3	0	0.0	0.0