非复制重组痘苗病毒表达人免疫缺陷病毒Bostwana C亚型Nef蛋白及免疫效果的观察

• 作者: 吕亦晨 张相民 李仁清 王世峰 王文玲 辛伟 邓瑶 郭斐 阮力 陆柔剑
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1) 非复制重组痘苗病毒 Nef蛋白 细胞毒性T细胞(CTL) Pep-IFN-'γ-Assay
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 97-103
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9|R512.91
• 字数: 5763字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2004.02.001

摘要

从含人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)Bostwana C亚型全基因的质粒pJM4-HIV中克隆了nef基因,并利用非复制型痘苗病毒载体构建表达Nef蛋白的重组病毒NTVJ1175nef,经PCR和Southern blot鉴定,nef基因正确整合到痘苗病毒基因组的J片段上;感染人源细胞后,经Western blot和免疫荧光检测表明,重组病毒能很好地表达Nef蛋白,并定位于细胞质中.NTVJ1175nef免疫BALB/c小鼠后,经Pep-IFN-'γ-Assay法检测,可诱导产生针对表位肽P1特异的可分泌IFN-'γ的C+8 T细胞(占脾细胞总数0.20%);经乳酸脱氮酶(LDH)法检测证实,诱导的细胞毒性T细胞(CTL)可特异性地杀伤表位肽P1特异P815靶细胞.这些结果表明,NTVJ1175nef具有良好的细胞免疫原性,为下一步构建表达包含HIV早期抗原的多组分重组痘苗病毒候选疫苗奠定了免疫学基础.