几种培养方法对ES/GFP小鼠胚胎干细胞系增殖和分化能力作用比较

• 作者: 吴旋 唐军 徐海伟 曹娟 范晓棠
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 神经前体细胞 细胞分化 白血病抑制因子 小鼠
• 年，卷（期）: 2004,（19）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 1775-1777
• 页数: 3页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2004.19.025

摘要

目的观察采用不同的饲养层和培养基对永久表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系ES/GFP的增殖、分化和绿色荧光蛋白表达的影响.方法分别采用小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层,采用含重组人白血病抑制因子的DMEM/FCS培养基和Buffalo条件培养基培养ES/GFP细胞系.N2无血清培养基诱导ES/GFP小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞,Nestin免疫组化染色.结果小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层,常规LIF培养液和Buffalo条件培养基均能较好维持ES/GFP细胞的高增殖能力和全能分化能力,对绿色荧光蛋白的表达和胚体形成、神经前体细胞的分化无明显差异.结论人胚胎成纤维细胞可替代小鼠胚胎成纤维细胞作为ES/GFP饲养层,减少饲养层制备的工作量和污染的机会.Buffalo条件培养基可完全替代LIF培养基,降低细胞培养的成本.