中国明对虾鳃细胞全长cDNA文库的构建

• 作者: 史成银 王维新 黄倢
• 来源期刊: 海洋水产研究
• 学科: 农学
• 关键词: 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) 鳃细胞 全长cDNA文库
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: Q81|S945.1
• 字数: 4662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7075.2004.05.002

摘要

利用SMART (Switching Mechanism at 5'end of RNA Transcript)技术,以同源重组的方式构建了中国明对虾鳃细胞的全长cDNA文库.首先用RNA提取试剂盒从中国明对虾鳃细胞中提取总RNA,以总RNA为模板,CDSⅢOligo(dT)为引物,反应一段时间后,再加入转换模板(Switching template),反转录合成cDNA第1链.在DNA聚合酶的作用下,通过长距离PCR,扩增双链DNA.双链cDNA经凝胶过滤柱纯化后,与线性化的pGADT7-Rec质粒载体同源重组,转化感受态AH109酵母菌株后,得到中国明对虾鳃细胞的全长cDNA文库.经测定该文库的容量为2.1×106,扩增后文库的滴度为7.3×107 cfu/ml.经菌落PCR测定,该文库的重组率为90%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄倢	中国水产科学研究院黄海水产研究所	111	1805	25.0	37.0
2	史成银	中国水产科学研究院黄海水产研究所	28	870	17.0	28.0
3	王维新	中国水产科学研究院黄海水产研究所	4	37	3.0	4.0