甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库的构建

• 作者: 孙晓凌 李海英 李荣田 郑天然 郭德栋
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 甜菜 无融合生殖 单体附加系 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-12
• 页数: 3页
• 分类号: Q785
• 字数: 3200字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2004.06.006

摘要

为了克隆甜菜单体附加系M14无融合生殖相关基因,采用cDNA文库快速构建法制备了M14花蕾cDNA文库.根据甜菜单体附加系M14无融合生殖的细胞胚胎学研究结果,提取甜菜M14花蕾三个关键时期的RNA,分离纯化mRNA,以Oligo(dT)为引物,在逆转录酶的作用下,合成第一链cDNA,进而合成第二链cDNA.含有EcoRⅠ和Not Ⅰ粘性末端的双链cDNA在T4DNA连接酶的作用下与载体λZAP臂相连,并对连接产物进行体外包装,得到噬菌体颗粒,即甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库.经大肠杆菌寄主菌株XL1-blue MRF'平板检测,三个文库滴度分别为2.8×105pfu·mL-1、1.6×105pfu·mL-1和3.5×105pfu·mL-1,克隆重组率为83%、78%和81%.cDNA文库可直接用于目的基因的筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李海英	黑龙江大学生命科学学院	43	457	12.0	20.0
2	郭德栋	黑龙江大学生命科学学院	37	442	12.0	20.0
3	李荣田	黑龙江大学生命科学学院	12	117	5.0	10.0
4	郑天然	黑龙江大学生命科学学院	3	13	2.0	3.0
5	孙晓凌	黑龙江大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0