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棉铃虫蜕皮调节转录因子在大肠杆菌中的重组表达及其包涵体纯化
棉铃虫蜕皮调节转录因子在大肠杆菌中的重组表达及其包涵体纯化
作者:
刘延荷
徐筠娉
王金星
蒋晓娟
赵小凡
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
棉铃虫
蜕皮调节转录因子
重组表达
包涵体纯化
抗体制备
摘要:
蜕皮调节转录因子(hormone receptor 3,HR3)在昆虫蜕皮过程中启动蜕皮相关早期基因簇表达,并抑制蜕皮相关晚期基因簇表达,对昆虫蜕皮级联反应起着关键的调控作用.利用合成的特异性引物通过RT-PCR扩增了棉铃虫Helicoverpa armigera蜕皮调节转录因子(HHR3),并与pGEX-4T-1载体连接,在大肠杆菌Escherichia coli DH5α内进行扩增,经过PCR筛选获得了HHR3-pGEX-4T-1重组质粒.用该质粒转化大肠杆菌表达菌株BL21并进行诱导表达,获得了与谷胱甘肽-S转移酶(GST)融合表达的HHR3包涵体,分子量在94 kD左右,通过无离子去垢剂CAPS(3-[cyclohexylamino]-1-propanesulfonic acid)变性、复性后获得了可溶性GST-HHR3融合蛋白,经凝血酶裂解和SDS-PAGE分离得到纯化的HHR3,经蛋白质N-端测序确认表达正确.用重组表达的HHR3免疫家兔,制备了兔抗HHR3多克隆抗体,免疫印迹检测显示该抗体对HHR3有特异性识别能力,可以用于HHR3功能与调控等下游研究.免疫印迹检测结果还表明,HHR3在5龄向6龄蜕皮的幼虫脂肪体中高表达,在进入6龄24 h的幼虫脂肪体中含量明显下降,在6龄72 h的幼虫中肠中没有检测到HHR3表达;成虫卵巢中有HHR3表达.
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传代效应
ORF27
序列分析
原核表达
内容分析
文献信息
引文网络
相关学者/机构
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内容分析
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文献信息
篇名
棉铃虫蜕皮调节转录因子在大肠杆菌中的重组表达及其包涵体纯化
来源期刊
昆虫学报
学科
生物学
关键词
棉铃虫
蜕皮调节转录因子
重组表达
包涵体纯化
抗体制备
年,卷(期)
2004,(3)
所属期刊栏目
生理与生化
研究方向
页码范围
281-286
页数
6页
分类号
Q966
字数
5035字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:0454-6296.2004.03.001
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
赵小凡
山东大学生命科学学院
50
618
13.0
24.0
2
王金星
山东大学生命科学学院
53
698
15.0
25.0
3
刘延荷
山东大学生命科学学院
2
17
2.0
2.0
4
蒋晓娟
山东大学生命科学学院
1
12
1.0
1.0
5
徐筠娉
山东大学生命科学学院
1
12
1.0
1.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
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共引文献
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节点文献
引证文献
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同被引文献
(8)
二级引证文献
(16)
1970(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1987(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1992(3)
参考文献(3)
二级参考文献(0)
1993(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1995(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1996(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1999(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2000(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2004(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
2005(1)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
2007(1)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
2008(2)
引证文献(2)
二级引证文献(0)
2010(4)
引证文献(3)
二级引证文献(1)
2012(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2013(4)
引证文献(2)
二级引证文献(2)
2014(4)
引证文献(3)
二级引证文献(1)
2015(2)
引证文献(0)
二级引证文献(2)
2016(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2018(6)
引证文献(0)
二级引证文献(6)
2019(2)
引证文献(0)
二级引证文献(2)
研究主题发展历程
节点文献
棉铃虫
蜕皮调节转录因子
重组表达
包涵体纯化
抗体制备
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
昆虫学报
主办单位:
中国科学院动物研究所
中国昆虫学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0454-6296
CN:
11-1832/Q
开本:
16开
出版地:
北京市朝阳区北辰西路1号院5号中国科学院动物研究所
邮发代号:
创刊时间:
1950
语种:
chi
出版文献量(篇)
3602
总下载数(次)
9
总被引数(次)
49239
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:
The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:
http://www.863.org.cn
项目类型:
重点项目
学科类型:
信息技术
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昆虫学报2004年第2期
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