肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响

• 作者: 万腊香 万载阳 刘录山 危当恒 唐朝克 杨永宗 甘露
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 关键词: 病理学与病理生理学 肥大细胞 泡沫细胞 胶原 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文摘要
• 页码范围: 176-176
• 页数: 1页
• 字数: 248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2004.02.038

摘要

目的检测大鼠腹腔肥大细胞(mast cell, MC)对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 SD大鼠体重约200 g,雌雄不限,供采集MC和原代培养平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC).采用梯度密度离心分离MC,提取MC上清液(含MC释放的各种炎症介质).用MC上清液和氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)处理SMC,实验分四组:对照组SMC在5 mL含10%小牛血清的DMEM中培养48 h;oxLDL组SMC在5 mL含10%小牛血清的DMEM中(含oxLDL,终浓度为100 mg/L)培养48 h;MC上清液组SMC在5 mL含10%小牛血清的MC上清液(由含1×106个MC的细胞悬液提取)中培养48 h;MC上清液+oxLDL组SMC在5 mL含10%小牛血清的MC上清液(由含1×106个MC的细胞悬液提取)中(含oxLDL,终浓度为100 mg/L)培养48 h.采用油红O染色检测SMC泡沫化.RT-PCR检测SMC Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达,PCR引物序列Ⅰ型胶原为5'-GAC ACT GAA CCC TTT GTA ATG-3'和5'-GTG AAA CTC CCG TCT GCT-3',扩增片段长度为399 bp;Ⅲ型胶原引物序列为5'-AGC GGA GAA TAC TGG GTT-3'和5'-TGT AAT GTT CTG GGA GGC-3',扩增片段长度为288 bp;内参照采用β-actin,引物序列为5'-GTG GGG CGC CCC AGG CAC CA-3'和5'-CTC CTT AAT GTC ACG CAC GAT TTC-3',扩增片段长度为548 bp.免疫细胞化学染色检测SMC Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达.结果油红O染色显示MC上清液可加速SMC泡沫化.RT-PCR结果发现,与对照组SMC相比,用oxLDL或MC上清液分别单独处理SMC 48 h后,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达均降低,用oxLDL和MC上清液同时处理SMC 48 h后,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达降低更明显.免疫细胞化学染色显示,对照组SMC细胞浆内有大量棕色颗粒,颗粒粗大而染色深,说明对照组Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达为强阳性;用oxLDL或MC上清液分别单独处理SMC 8 h后,细胞浆内棕色颗粒少而染色浅,说明Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达均明显降低;用oxLDL和MC上清液同时处理SMC 48 h后,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达降低更明显.结论 MC在体外抑制SMCⅠ型胶原和Ⅲ型胶原表达,并且能协同oxLDL对Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的抑制作用.因此MC释放的炎症介质也许参与了动脉粥样斑块纤维帽的重构.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐朝克	南华大学心血管病研究所	95	749	15.0	22.0
2	杨永宗	南华大学心血管病研究所	125	1252	19.0	29.0
3	万腊香	南华大学心血管病研究所	15	93	6.0	9.0
4	万载阳	南华大学心血管病研究所	25	240	9.0	14.0
5	刘录山	南华大学心血管病研究所	62	416	11.0	17.0
6	危当恒	南华大学心血管病研究所	31	182	7.0	12.0
7	甘露	南华大学心血管病研究所	17	33	3.0	5.0