BPOZ基因剔除小鼠模型的建立

• 作者: 严兰珍 傅继梁 刘伟 孙霞 徐国江 杨桦 王一 王铸钢 王龙 许勇 费俭 项佑贵
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: BPOZ基因 细胞生长抑制基因 基因剔除
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 616-621
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2004.07.008

摘要

BPOZ是在卵巢癌等肿瘤组织中表达下调的细胞生长抑制基因,建立BPOZ基因剔除小鼠模型,可以为在体研究BPOZ基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系创造条件.运用生物信息学手段确定小鼠BPOZ基因组序列,设计基因剔除策略,构建完成了基因剔除载体XpPNT-BPOZ.以电穿孔方法将基因剔除载体导入ES细胞,用G418和Ganciclovoir进行正负筛选,获得抵抗克隆,PCR和DNA印迹鉴定出正确同源重组的ES细胞克隆.将同源重组的ES细胞注入小鼠囊胚,获得嵌合体小鼠.嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配后获得Aguoti毛色的小鼠30只,其中15只为BPOZ基因剔除杂合子小鼠,阳性率为50%.在雌雄杂合子交配的后代中获得纯合子小鼠.初步的表型观察发现BPOZ基因剔除小鼠发育正常,有繁殖能力,进一步的表型分析工作正在进行之中.