改良大鼠视网膜节细胞逆行标记方法的建立

• 作者: 张卯年 马志中 黄厚斌
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜节细胞 荧光金 神经示踪 大鼠
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 341-344
• 页数: 4页
• 分类号: R774|Q959.836
• 字数: 5225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2004.05.004

摘要

目的建立一种易于规范的、简易准确的视网膜节细胞(retinal ganglion cell,RGC)计数方法.方法根据大鼠脑立体定位图谱确定双侧上丘和外侧膝状体在颅骨表面的投影,在投影处钻4或8个骨孔,用血管钳夹住微量进样器的尖端控制注射深度,注入10g·L-1荧光金.2周后取视网膜铺片在荧光显微镜下计数视网膜后极部、赤道部、远周部及背侧、尾侧、腹侧、嘴侧各象限RGC的数目,同时将视网膜铺片行甲苯酚紫染色后RGC计数.结果所有动物均开颅手术标记成功.4点、8点标记法标记的正常RGC的数目分别为(2 219±282)个·mm-2和(2 207±267)个·m-2,2者无显著差异;四点法标记的大鼠RGC后极部、赤道部、远,周部分别为(2 499±367)个·mm-2、(2 215±287)个mm-2、(1944±210)个·mm-2,八点法标记的大鼠RGC后极部、赤道部、远周部分别为(2 521±357)个·mm-2、(2181±286)个·mm-2、(1920±190)个·mm-2,其中后极部与远周部有显著差异;四点法标记的大鼠RGC背、尾、腹、嘴侧各象限RGC的数目分别为(2 288±303)个·mm-2、(2189±277)个·mm-2、(2242±267)个·mm-2、(2 159±305)个·mm-2,八点法标记的大鼠RGC背、尾、腹、嘴侧各象限RGC的数目分别为(2169±284)个·mm-2、(2 216±239)个·mm-2、(2 297±273)个·mm-2、(2 146±297)个·mm-2,彼此间没有显著差异.甲苯酚紫染色进行RGC计数的变异系数为27.14%,荧光金逆标RGC计数的变异系数11.52%,2者间有显著差异.结论荧光金逆行标记是进行RGC计数的极好方法.