麻疹病毒全长cDNA构建及其感染性的研究

• 作者: 于建石 孙玉兰 孟祥芝 张全福 李川 李德新 梁米芳 王晓芳 胡孔新
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 麻疹病毒 全长cDNA 反向遗传
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 210-213
• 页数: 4页
• 分类号: R373.11
• 字数: 3384字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2004.03.003

摘要

为发展新型疫苗和改造目前使用的麻疹病毒疫苗,以麻疹病毒疫苗株为模板,构建了具有感染性的麻疹病毒cDNA克隆.用RT-PCR分6段扩增出麻疹病毒全长基因,通过酶切、拼接构建麻疹病毒疫苗株CC-47的全长正链cDNA序列,并精确地置于T7启动子控制下与丁型肝炎病毒核酶序列之前.克隆麻疹病毒CC-47株蛋白N、P、L编码区质粒并置于T7启动子控制下,用4个质粒共转染哺乳动物细胞,在表达T7 RNA聚合酶的重组痘苗病毒VTF7-3的作用下进行病毒拯救.经免疫荧光、PCR等方法检测证实,获得了具有感染性的麻疹病毒.所拯救的病毒在哺乳动物细胞连续传3代后,仍能检出病毒抗原和核酸.