表达猪细小病毒VP2基因的重组伪狂犬病毒的构建及其生物学特征研究

• 作者: 何启盖 吕建强 方六荣 熊符 赵俊龙 陈焕春
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病毒 猪细小病毒 VP2基因 TK-/gG-/VP+2株
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 133-137
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4073字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2004.02.007

摘要

根据Bergeron等报道的猪细小病毒(PPV)基因组,设计一对包含VP2全基因的PCR引物,上下游均引入一个BamHI位点,扩增得到VP2基因后,将其插入到pUSK载体中,构建了转移载体pUSK-VP2.采用脂质体介导的转染方法,将伪狂犬病毒TK-/gG-/LacZ+株的基因组DNA与pUSK-VP2共转染PK-15细胞,待细胞病变后收集病毒液,在空斑纯化的同时,利用检测PPV VP2基因和LacZ基因的PCR方法筛选重组病毒TK-/gG-/VP+2株,Southern blotting、SDS-PAGE、Western blotting和电镜观察鉴定重组病毒,并在不同细胞上测定重组病毒的增殖滴度,接种小鼠进行安全性试验.结果发现,外源基因VP2已成功地插入到TK-/gG-/LacZ+亲本株的基因组中,并获得了表达.表达的VP2蛋白可以与猪细小病毒阳性血清反应,而且可以自行装配成病毒样颗粒.同时发现,VP2基因的插入不影响重组病毒的增殖特性,其毒力与亲本株相当.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学农业部农业微生物重点实验室	331	4866	36.0	53.0
2	何启盖	华中农业大学农业部农业微生物重点实验室	170	2510	25.0	42.0
3	方六荣	华中农业大学农业部农业微生物重点实验室	75	818	15.0	24.0
4	赵俊龙	华中农业大学农业部农业微生物重点实验室	62	644	13.0	23.0
5	吕建强	华中农业大学农业部农业微生物重点实验室	14	420	12.0	14.0
6	熊符	华中农业大学农业部农业微生物重点实验室	2	67	2.0	2.0