蛋白激酶Cα在小鼠胚胎干细胞诱导分化为神经样细胞中的表达变化

• 作者: 王智崇 葛坚 袁钊辉 陈慧怡 高前应 黄丹平
• 来源期刊: 眼科学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎 干细胞 蛋白激酶Cα 细胞分化 神经元
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 107-112
• 页数: 6页
• 分类号: R77
• 字数: 3981字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4432.2004.02.014

摘要

目的:研究小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)定向诱导分化为神经样细胞过程中蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)的表达变化,探讨可能涉及ESC定向分化的信号机制.方法:ES-D3细胞株用不含小鼠白血病抑制因子(mouseleukemiainhibitoryfactor,mLIF)的ESC培养液培养4 d,形成胚胎体(embryoid bodies,Ebs),再分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100mm的培养皿,经5×10-7 mol/L维甲酸(retinoic acid,RA)诱导后,用神经特异性烯醇化酶(NSE)和NF-200来鉴定分化细胞的类型,在诱导后第1、3、5、7和14天用Western印迹和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测PKCα亚型的表达变化.结果:诱导前免疫组化发现PKCα在ES-D3细胞有广泛的棕黄色的阳性表达,以细胞浆和细胞膜最明显;Western印迹发现PKCα出现一条蛋白印迹条带,分子量约为84kD;诱导后第3天,NSE和NF-200开始表达,第7天达到高峰;诱导后Western印迹和RT-PCR方法都显示PKCα表达量急剧下降,以后逐渐升高,至第14天基本恢复至正常水平.结论:在RA诱导ESC定向分化为神经样细胞过程中,PKCα有独特的时空表达特点,它可能对ESC的分化有非常重要的调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王智崇	中山大学中山眼科中心	22	159	7.0	12.0
2	葛坚	中山大学中山眼科中心	105	969	16.0	25.0
3	黄丹平	中山大学中山眼科中心	24	129	7.0	10.0
4	高前应	中山大学中山眼科中心	14	67	4.0	8.0
5	陈慧怡	中山大学中山眼科中心	11	128	4.0	11.0
6	袁钊辉	中山大学中山眼科中心	16	80	6.0	8.0