人血小板衍生生长因子B链成熟肽基因克隆及表达

• 作者: 唐焕章 张忠民 杨春露 谭小云 邓凡 金大地 陈建庭
• 来源期刊: 中华外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原癌基因蛋白质c-sis类 基因表达 骨折愈合
• 年，卷（期）: 2004,（19）
• 所属期刊栏目: 创伤骨科
• 页码范围: 1170-1173
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 3485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0529-5815.2004.19.005

摘要

目的获得足量的PDGF-BB蛋白,作为PDGF-BB促进骨折愈合及创伤修复等进一步功能研究和临床应用的基础.方法用基因重组技术构建pQE-PDGF-B原核表达载体,在M15大肠杆菌中进行PDGF-B单体蛋白的表达.结果经酶切鉴定、PCR鉴定及基因测序证明,pQE30载体上成功地插入了PDGF-B成熟肽基因;重组表达载体pQE-PDGF-B在M15大肠杆菌中得到了高效表达,表达量约占全菌蛋白的15%,表达的PDGF-B单体蛋白经SDS PAGE电泳,显示了一条特异蛋白带,分子量为15 kD左右.结论 PDGF-B原核表达载体的成功构建和PDGF-B单体蛋白制备纯化为生产活性PDGF-BB蛋白及其进一步功能研究奠定了基础.