基质金属蛋白酶2、9和血管内皮生长因子在碱烧伤小鼠角膜组织中的表达

• 作者: 党颖 冯怡 冯玉梅 周岐新 曾昭淳 朱旭东 马清钧
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 碱烧伤 角膜新生血管形成 实时定量PCR 基质金属蛋白酶
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 561-565
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2004.06.006

摘要

采取滤纸片放置法,用1 mol/L的NaOH在小鼠角膜中央进行碱烧伤,建立动物模型.取烧伤前和烧伤后的小鼠角膜制备组织切片,用抗MMP2、抗MMP9和抗VEGF的抗体分别进行免疫组化染色,检测它们在碱烧伤前后的小鼠角膜组织中的蛋白表达情况;提取碱烧伤前和碱烧伤后不同时间点的小鼠角膜组织的总RNA并进行逆转录,以获得的逆转录产物作为模板,用特异的引物和探针进行实时定量PCR,分别检测MMP2、MMP9和VEGF在碱烧伤前后的小鼠角膜组织中转录水平的变化;提取碱烧伤前后小鼠角膜的蛋白组分,用明胶底物酶谱的方法检测其中MMP2和MMP9的活性变化.结果表明,浸透1 mol/L的NaOH的滤纸小片,对小鼠角膜进行碱烧伤可以有效地诱导角膜新生血管形成,烧伤后3～4 d就有明显的新生血管形成,至第8、9 d左右开始退行.免疫组化结果显示,正常角膜中没有MMP9和VEGF表达,MMP2表达极低;碱烧伤后3种因子的表达均上升.实时定量PCR的结果显示MMP2在碱烧伤后表达升高,第3 d达到最高随后下降;MMP9在正常角膜组织中没有表达,碱烧伤后第l d达到最高之后开始下降;VEGF在正常角膜中也没有表达,碱烧伤后第4d达到高峰之后开始下降.以上结果说明碱烧伤后的角膜组织中MMP2、MMP9和VEGF的表达均经历先上升后下降的变化,与角膜愈合及新生血管发育和退化过程相吻合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周岐新	重庆医科大学药理学教研室	190	1564	18.0	29.0
2	曾昭淳		53	249	10.0	13.0
3	马清钧	军事医学科学院生物工程研究所	147	1208	18.0	29.0
4	朱旭东	军事医学科学院生物工程研究所	28	118	6.0	9.0
5	冯玉梅	军事医学科学院生物工程研究所	3	9	2.0	3.0
9	冯怡	军事医学科学院生物工程研究所	11	42	3.0	6.0
10	党颖	军事医学科学院生物工程研究所	9	45	4.0	6.0