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摘要:
构建了重组双功能水蛭素 ( Recombinant-RGD-Hirudin、 r-RGD-Hirudin ) cDNA 的表达质粒 RGD-Hirudin-pPIC9K,转化入毕赤酵母中,经筛选得到高表达的阳性克隆.种子菌经过3d发酵培养,其培养液上清经超滤浓缩、凝胶过滤层析和离子交换层析后,得到纯度大于97%、比活性为 12000 ATU/mg 的 r-RGD-Hirudin,回收率大于 60%,发酵产率为 1 g/L.纯化后的 r-RGD-Hirudin 经过还原SDS-PAGE,抗凝血酶活力分析、抗血小板聚集分析、质谱分析及等电聚焦分析等方法鉴定,证明该表达产物为水蛭素的衍生物,具有抗凝血酶和抗血小板聚集双重功能.
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文献信息
篇名 重组双功能水蛭素的发酵、纯化和鉴定
来源期刊 生物工程学报 学科 生物学
关键词 重组双功能水蛭素(r-RGD-Hirudin) 高效表达 发酵 纯化 鉴定
年,卷(期) 2004,(1) 所属期刊栏目 研究简报
研究方向 页码范围 126-129
页数 4页 分类号 Q78
字数 3974字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.01.025
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 宋后燕 复旦大学教育部分子医学重点实验室 94 467 12.0 17.0
2 莫炜 复旦大学教育部分子医学重点实验室 22 92 6.0 9.0
3 王龙生 复旦大学教育部分子医学重点实验室 2 26 2.0 2.0
4 张艳玲 复旦大学教育部分子医学重点实验室 3 29 2.0 3.0
5 杨新英 复旦大学教育部分子医学重点实验室 2 23 1.0 2.0
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重组双功能水蛭素(r-RGD-Hirudin)
高效表达
发酵
纯化
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生物工程学报
月刊
1000-3061
11-1998/Q
大16开
北京朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所B401
82-13
1985
chi
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