摘要:
目的觀察益骨膠囊含藥血清對體外培養SD大鼠成骨細胞增殖的影響,以探討該方防治骨質疏鬆可能的作用機制.方法1)益骨膠囊藥液的製備:取淫羊藿、當歸等8味免煎顆粒,以蒸餾水浸泡,使充分溶化後,經過濾、離心,加95%乙醇等處理,再濃縮後備用.2)益骨膠囊含藥血清的製備:選用12月齡雌性SD大鼠40隻,随機分為4組:高、中、低劑量給藥組和生理鹽水組,每組10隻;用灌胃法給服益骨膠囊藥液或生理鹽水,每天1次,連續灌胃12天,在末次灌胃後1.5小時,無菌條件下右心室取血,離心後血清56℃、30min滅活,-70℃保存備用.3)實驗分組:採用二次酶消化法從新生SD大鼠顱骨獲取成骨細胞,傳代培養,取第5代成骨細胞為實驗模型,建立益骨膠囊含藥血清與成骨細胞體外培養模型,分為2組:含藥血清組和空白血清對照組(終濃度均為25%),每組4瓶,其中2瓶培養24小時、2瓶培養36小時後,測定細胞周期.4)檢測方法:採用流式細胞儀技術測定成骨細胞細胞周期.5)資料處理方法:資料結果以x±s表示,使用SPSS 10.0統計軟體對資料進行處理,和對照組比較用t檢驗.結果益骨膠囊含藥血清對成骨細胞細胞周期的影響:含藥血清組在24小時及36小時G0/G1期細胞比率(分別為61.61±1.27%,61.54±3.97%)均顯著低於空白血清組(P<0.01);含藥血清組在24小時及36小時S期細胞比率(分別為19.71±1.48%,23.27±0.50%)、細胞增殖指數(分別為31.66±1.46%,32.57±2.97%)、G2/M期細胞比率(分別為8.85±0.15%,6.41±1.60%)均顯著高於空白血清組(P<0.05).結論益骨膠囊含藥血清能促進成骨細胞增殖,這些可能是該方防治骨質疏鬆的機理之一.