用RT-PCR法检测食品中诺沃克样病毒

• 作者: 付溥博 冯骞 张惠媛 陈广全 饶红
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 学科: 工学
• 关键词: RT-PCR法 检测 贝类 诺沃克样病毒
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 106-112
• 页数: 7页
• 分类号: TS2
• 字数: 5963字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-990X.2004.12.025

摘要

使用RT-PCR法对贝类样品中的诺沃克样病毒进行了检测.对食品中不同的病毒富集方法进行了研究,评价了CHCl3和Frezon去除RT-PCR抑制剂的效果,筛选出最佳的病毒富集方法:即2次PEG 6000(终浓度12% PEG6000,0.3 mol/L NaCl)沉降病毒,并使用CHCl3除去RT-PCR抑制剂.此富集方法的回收率为13.5%.另外,对不同的RNA提取方法的灵敏度进行了比较,最终确认硅胶膜法为简便、快速、有效的RNA提取方法.并且,使用了Superscript反转录酶进行反转录,提高了检测的灵敏度.选用了289和290混合引物进行食品中NLVs的检测,这一引物组合可同时检测Ⅰ型和Ⅱ型NLVs,扩增出1个319bp的特异性片段.通过以上条件的优化,建立了通过RT-PCR检测贝类中NLVs的有效方法.该方法的NLVs最低检出限为1.0×103 RT-PCR50/1.5 g.对32件贝类样品进行了NLVs的检测,其中2份毛蚶中被检出NLVs.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈广全		34	227	8.0	13.0
2	张惠媛		25	185	8.0	13.0
3	饶红		27	105	7.0	9.0
4	冯骞		14	129	7.0	11.0
5	付溥博		9	37	3.0	6.0