体外化学诱导人骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞

• 作者: 孟玲 岳文 曹丰 牛丽丽 白慈贤 裴雪涛 贾国良 赵连旭 郑敏
• 来源期刊: 实验生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人骨髓间充质干细胞 心肌 分化 化学诱导
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 118-124
• 页数: 7页
• 分类号: R5
• 字数: 5349字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-520X.2004.02.006

摘要

为了探讨人骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外培养及化学诱导向心肌细胞分化的过程及条件,我们用1.073g/mL密度梯度离心法分离健康人骨髓单个核细胞,经骨髓间充质干细胞培养基传代培养后用流式细胞仪检测细胞表面抗原,在完全培养基中分别加入3、5、10μmol/L的5氮胞苷(每组n--5)进行化学诱导分化,阴性对照组采用完全培养基培养,诱导后21天细胞爬片免疫荧光法鉴定,透射电镜观察细胞超微结构.结果显示人MSCs为形态均一的梭形细胞,生长旺盛时呈旋涡样分布,流式细胞仪检测细胞表面CD44阳性,CD34、CD45阴性;5、10μmol/L的5氮胞苷进行化学诱导后细胞形态变长,诱导后14天时20%-30%细胞融合形成多核肌管样结构,3μmol/L组MSCs未出现肌管结构,诱导后21天5、10μmol/L组MSCs中desmin、心肌早期转录因子GATA4、心肌特异性cTnI及闰盘蛋白connexin43的表达阳性,10μmol/L组cTnI阳性染色细胞数目(65.3±4.7%)高于5μmol/L诱导组(48.2±5.4%)(p＜0.05);3μmol/L组及阴性对照组无心肌特异性蛋白的表达.细胞诱导后28天透射电镜下可见肌丝形成.本实验说明,人MSCs在体外经化学诱导可分化为心肌样细胞,而且5-氮胞苷对于心肌相关蛋白的表达呈浓度依赖性正相关.