钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
学术导航
任务中心
论文润色
登录
文献导航
学科分类
>
综合
工业技术
科教文艺
医药卫生
基础科学
经济财经
社会科学
农业科学
哲学政法
社会科学II
哲学与人文科学
社会科学I
经济与管理科学
工程科技I
工程科技II
医药卫生科技
信息科技
农业科技
数据库索引
>
中国科学引文数据库
工程索引(美)
日本科学技术振兴机构数据库(日)
文摘杂志(俄)
科学文摘(英)
化学文摘(美)
中国科技论文统计与引文分析数据库
中文社会科学引文索引
科学引文索引(美)
中文核心期刊
cscd
ei
jst
aj
sa
ca
cstpcd
cssci
sci
cpku
默认
篇关摘
篇名
关键词
摘要
全文
作者
作者单位
基金
分类号
搜索文章
搜索思路
钛学术文献服务平台
\
学术期刊
\
医药卫生期刊
\
肿瘤学期刊
\
癌症期刊
\
应用AdEasier-1系统高效制备含VEGFP驱动TK自杀基因的重组腺病毒
应用AdEasier-1系统高效制备含VEGFP驱动TK自杀基因的重组腺病毒
作者:
宋慧娟
车小燕
陈建发
黄元媛
黄宗海
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
肿瘤
重组腺病毒
载体
自杀基因治疗
血管内皮生长因子
摘要:
背景及目的:自杀基因疗法的瓶颈之一是自杀基因在肿瘤细胞的特异性表达水平低.利用肿瘤特异性启动子来调控自杀基因使其在肿瘤细胞中特异性表达已成为肿瘤自杀基因研究的热点.研究证实血管内皮生长因子在绝大多数实体瘤细胞中都有过量表达而在正常组织中不表达或表达甚微,其过量表达与血管内皮生长因子启动子( vascular endothelial growth factor promoter,VEGFP)活性上调有关.为研究 VEGFP可否提高 TK自杀基因在肿瘤细胞的特异性表达水平,本研究应用一种高效的重组腺病毒构建系统,即 AdEasier 1系统制备含 VEGFP驱动 TK自杀基因的重组腺病毒.方法: VEGFP自 pEGFP 1 SV VEGFP切下后插入 pAdtrack载体上构建 pAdtrack VEGFP.用 Hind Ⅲ /XbaⅠ自 pREP8 TK切出带 polyA加尾信号的 TK基因,亚克隆到 pAdtrack VEGFP中构建转移质粒 pAdtrack VEGFP TK. PmeⅠ酶线性化转移质粒 pAdtrack VEGFP TK,转化含腺病毒基因组质粒 pAdEasy 1的细菌 AdEasier 1,用 25 μ g/ml卡那霉素筛选阳性克隆,先后进行琼脂糖电泳和 PacⅠ酶切鉴定,筛选出正确重组腺病毒质粒 pAdEasy VEGFP TK,经 293细胞包装、扩增获得重组腺病毒 Ad VEGFP TK,行酶切鉴定、 PCR鉴定和测序.结果:卡那霉素抗性细菌只有两种,一种含 pAdEasy VEGFP TK(大于 33 kb),另一种含 pAdtrack VEGFP TK(约 12 kb),两者容易经琼脂糖电泳加以鉴别.经 PacⅠ酶切后,重组腺病毒质粒可产生一大于 33 kb的大片段和一约为 3 kb的特征性小片段.构建重组腺病毒质粒的成功率为 60%( 6/10).包装扩增后重组腺病毒的滴度为每毫升 5.6× 1012病毒颗粒, BamHⅠ和 SpeⅠ酶切后重组腺病毒分别产生 5 kb和 11 kb大小的特征性片段; PCR扩增结果与预期相符.申友生物技术有限公司测序结果正确,错误率 < 1%.结论:应用 AdEasier 1系统可以高效快速制备含 VEGFP驱动 TK自杀基因的重组腺病毒.
暂无资源
收藏
引用
分享
推荐文章
含融合自杀基因CDglyTK复制型重组腺病毒的构建与鉴定
基因,病毒
基因疗法
腺病毒科
基因,转基因,自杀
基因表达
腺病毒介导HSV-TK/GCV自杀基因系统靶向性治疗前列腺癌实验研究
前列腺癌
重组腺病毒
自杀基因
人端粒酶逆转录酶启动子
应用AdEasy-1腺病毒系统构建含人nm23-H1基因的重组腺病毒质粒
nm23-H1基因
腺病毒载体
同源重组
应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒
腺病毒
双自杀基因治疗
AdEasy系统
氯化钙转化法
内容分析
文献信息
引文网络
相关学者/机构
相关基金
期刊文献
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数
(/次)
(/年)
文献信息
篇名
应用AdEasier-1系统高效制备含VEGFP驱动TK自杀基因的重组腺病毒
来源期刊
癌症
学科
医学
关键词
肿瘤
重组腺病毒
载体
自杀基因治疗
血管内皮生长因子
年,卷(期)
2004,(9)
所属期刊栏目
技术与方法
研究方向
页码范围
1093-1097
页数
5页
分类号
R73.36
字数
4541字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1000-467X.2004.09.025
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
宋慧娟
第一军医大学珠江医院普外科
12
56
5.0
7.0
2
黄宗海
第一军医大学珠江医院普外科
72
404
10.0
14.0
3
车小燕
第一军医大学珠江医院中心实验室
28
161
8.0
11.0
4
陈建发
第一军医大学珠江医院普外科
8
53
5.0
7.0
5
黄元媛
第一军医大学珠江医院普外科
4
29
3.0
4.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(23)
共引文献
(27)
参考文献
(10)
节点文献
引证文献
(7)
同被引文献
(6)
二级引证文献
(6)
1986(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1992(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
1994(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1995(5)
参考文献(0)
二级参考文献(5)
1997(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
1998(4)
参考文献(1)
二级参考文献(3)
1999(3)
参考文献(0)
二级参考文献(3)
2000(5)
参考文献(0)
二级参考文献(5)
2001(7)
参考文献(3)
二级参考文献(4)
2002(4)
参考文献(3)
二级参考文献(1)
2003(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2004(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
2005(3)
引证文献(3)
二级引证文献(0)
2006(1)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
2007(3)
引证文献(2)
二级引证文献(1)
2009(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2010(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2011(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2012(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2017(1)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
2020(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
研究主题发展历程
节点文献
肿瘤
重组腺病毒
载体
自杀基因治疗
血管内皮生长因子
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
癌症
主办单位:
中山大学肿瘤防治中心
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-467X
CN:
44-1195/R
开本:
大16开
出版地:
广州市东风东路651号
邮发代号:
46-21
创刊时间:
1982
语种:
chi
出版文献量(篇)
4801
总下载数(次)
1
总被引数(次)
58897
相关基金
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:
The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:
http://www.863.org.cn
项目类型:
重点项目
学科类型:
信息技术
广东省自然科学基金
英文译名:
Guangdong Natural Science Foundation
官方网址:
http://gdsf.gdstc.gov.cn/
项目类型:
研究团队
学科类型:
期刊文献
相关文献
1.
含融合自杀基因CDglyTK复制型重组腺病毒的构建与鉴定
2.
腺病毒介导HSV-TK/GCV自杀基因系统靶向性治疗前列腺癌实验研究
3.
应用AdEasy-1腺病毒系统构建含人nm23-H1基因的重组腺病毒质粒
4.
应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒
5.
含血管内皮生长因子启动子驱动CD自杀基因重组腺病毒的制备及其体外杀伤作用观察
6.
高效化学转化菌内同源重组法构建重组腺病毒
7.
新法制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒
8.
人凝血酶敏感蛋白1抗血管生成活性片段重组腺病毒高效制备
9.
含人谷胱苷肽过氧化物酶基因重组腺病毒的构建
10.
人神经菌毛素-1基因重组腺病毒的构建及鉴定
11.
腺病毒-tk基因同源重组系统构建的研究
12.
应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒
13.
含胞嘧啶脱氨酶基因重组腺病毒体内抑瘤作用的研究
14.
腺病毒为载体的HSV1-TK基因对肿瘤细胞系抑制作用的研究
15.
VEGF启动子介导双自杀基因重组腺病毒对LoVo细胞的体外杀伤作用
推荐文献
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
学术导航
任务中心
论文润色
登录
根据相关规定,获取原文需跳转至原文服务方进行注册认证身份信息
完成下面三个步骤操作后即可获取文献,阅读后请
点击下方页面【继续获取】按钮
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
原文合作方
继续获取
获取文献流程
1.访问原文合作方请等待几秒系统会自动跳转至登录页,首次访问请先注册账号,填写基本信息后,点击【注册】
2.注册后进行实名认证,实名认证成功后点击【返回】
3.检查邮箱地址是否正确,若错误或未填写请填写正确邮箱地址,点击【确认支付】完成获取,文献将在1小时内发送至您的邮箱
*若已注册过原文合作方账号的用户,可跳过上述操作,直接登录后获取原文即可
点击
【获取原文】
按钮,跳转至合作网站。
首次获取需要在合作网站
进行注册。
注册并实名认证,认证后点击
【返回】按钮。
确认邮箱信息,点击
【确认支付】
, 订单将在一小时内发送至您的邮箱。
*
若已经注册过合作网站账号,请忽略第二、三步,直接登录即可。
期刊分类
期刊(年)
期刊(期)
期刊推荐
中国医学
临床医学
五官科学
内科学
医疗保健
医药卫生总论
基础医学
外科学
大学学报
妇产科学与儿科学
特种医学
皮肤病学与性病学
神经病学与精神病学
肿瘤学
药学
预防医学与卫生学
癌症2022
癌症2021
癌症2020
癌症2019
癌症2018
癌症2017
癌症2016
癌症2015
癌症2014
癌症2013
癌症2012
癌症2011
癌症2010
癌症2009
癌症2008
癌症2007
癌症2006
癌症2005
癌症2004
癌症2003
癌症2002
癌症2001
癌症2000
癌症1999
癌症2004年第z1期
癌症2004年第9期
癌症2004年第8期
癌症2004年第7期
癌症2004年第6期
癌症2004年第5期
癌症2004年第4期
癌症2004年第3期
癌症2004年第2期
癌症2004年第12期
癌症2004年第11期
癌症2004年第10期
癌症2004年第1期
关于我们
用户协议
隐私政策
知识产权保护
期刊导航
免费查重
论文知识
钛学术官网
按字母查找期刊:
A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
L
M
N
O
P
Q
R
S
T
U
V
W
X
Y
Z
其他
联系合作 广告推广: shenyukuan@paperpass.com
京ICP备2021016839号
营业执照
版物经营许可证:新出发 京零 字第 朝220126号