新疆O139群霍乱弧菌93006菌株基因组文库的构建

• 作者: 段广才 范清堂 谢婧 郗园林
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 基因组文库 霍乱弧菌 粘粒载体
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 437-439
• 页数: 3页
• 分类号: R181
• 字数: 2357字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2004.03.028

摘要

目的:构建我国新疆分离O139群霍乱弧菌菌株(93006菌株)的基因组文库,为研究我国O139群霍乱弧菌的来源及其基因组特征提供资料.方法:制备霍乱弧菌高相对分子质量的基因组DNA,用Sau3AI酶将基因组DNA部分酶切成平均大小为32～40kb的片段,将部分酶切并经碱性磷酸酶(CIAP)处理的DNA片段与经XbaI、CIAP、BamHI处理的粘粒载体SuperCos1的载体臂相连接,连接产物经体外包装并转染大肠杆菌XL-Blue1 MR,经氨苄抗性筛选得到阳性克隆,构建霍乱弧菌的基因组文库.结果:该文库共获得了1 200个单克隆,平均插入片段的大小为32kb,空载率为0.05%,相当于9个库容量,从本文库中筛选到任一霍乱弧菌的DNA单拷贝序列的机率为99.98%,该文库能承受7次反复冻溶.结论:成功构建了我国新疆分离O139群霍乱弧菌菌株93006的基因组文库,为进一步克隆霍乱弧菌的基因和研究我国O139群霍乱弧菌的来源奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段广才		32	98	5.0	7.0
2	郗园林	郑州大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学教研室	119	673	13.0	20.0
3	范清堂		38	152	5.0	10.0
4	谢婧	郑州大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学教研室	37	458	13.0	20.0