荧光探针在光动力疗法亚细胞损伤位点研究中的应用

• 作者: 于立方 刘凡光 戴维德 曾晶 李晓松 王雷 顾瑛
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 血卟啉单甲醚 荧光探针 光动力损伤
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 专题综述
• 页码范围: 148-153
• 页数: 6页
• 分类号: R454.2
• 字数: 4463字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2004.02.016

摘要

目的:应用荧光探针在光动力疗法研究中检测亚细胞损伤位点.方法:传代培养鼠肺毛细血管内皮细胞,将血卟啉单甲醚(HMME)与内皮细胞共同孵育24小时后,加入线粒体探针Rhodamine-123、内质网探针DioC6(3)和溶酶体探针Lucifer yellow分别对细胞器染色.首先采用激光共聚焦显微镜对光敏剂进行亚细胞定位.应用荧光显微镜汞灯照射激发光敏剂的光动力效应,加入ROS探针H2DCF-DA检测产生的单线态氧.分别在激发前后采集Rhodamine-123、Lucifer yellow和DioC6(3)的荧光图像.结果:线粒体探针Rhoamine-123的荧光图像在光动力损伤前后差异显著,原有形态特点发生明显改变;Rhodamine-123在光动力损伤后再分布于细胞核区.结论:血卟啉单甲醚介导的光动力效应导致亚细胞水平多位点损伤,线粒体和核膜可能是PDT敏感位点;荧光探针标记检测光动力损伤亚细胞位点方法简便可靠.