用于FK506类小分子化合物筛选的细胞模型的建立

• 作者: 于鸣 李松 沈倍奋 肖鹤 黎燕
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 融合表达 细胞模型 细胞凋亡 竞争抑制
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 895-901
• 页数: 7页
• 分类号: Q2
• 字数: 4030字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2004.10.007

摘要

建立FKBP12/Fas双聚体可诱导细胞凋亡生物效应的细胞模型,为FK506类小分子化合药物的初步筛选提供一个可应用的技术平台.首先利用RT-PCR方法钓取人源性Fas胞浆区基因,测序鉴定正确后,插入到载体pC4M-FV2E中,构建pC4M-FV2E/Fas表达质粒.然后将Myr-FKBP12-Fas融合基因从pC4M-FV2E/Fas质粒克隆进pEGFP-N1中.最后将重组质粒pEGFP-N1/FKBP12-Fas转染进HEK293细胞,并利用G418筛选融合基因FKBP12-Fas稳定表达的细胞株.实验结果显示,阳性化合物AP20187作用4～6 h后,稳定转染的靶细胞发生凋亡,基因组呈现典型的"DNA Ladder",而FKBP12的天然结合蛋白FK506可竞争性地阻断这种阳性药物诱导的细胞凋亡.研究提示:所构建的细胞模型,可用于以FKBP12为靶标、基于FK506空间构型设计合成的FK506类小分子化合药物的初步筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈倍奋	军事医学科学院基础医学研究所	213	1497	18.0	31.0
2	黎燕	军事医学科学院基础医学研究所	139	930	14.0	25.0
3	李松	军事医学科学院毒物药物研究所	107	673	13.0	21.0
4	于鸣	军事医学科学院基础医学研究所	38	185	8.0	12.0
5	肖鹤	军事医学科学院基础医学研究所	16	189	5.0	13.0