Ro60 cDNA的克隆及其重组杆状病毒表达载体的构建

• 作者: 张建中 郭利劭
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因复制 遗传载体 Ro60
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 105-108
• 页数: 4页
• 分类号: R751
• 字数: 2859字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2004.02.015

摘要

目的构建人Ro60 cDNA的杆状病毒表达载体.方法采用逆转录-PCR技术从Hela细胞RNA中扩增Ro60 cDNA,定向插入杆状病毒转移载体pFastBac HTc,转化大肠杆菌DH10 Bac进行转座,提取重组Bacmid,通过蓝白斑筛选和PCR进行鉴定.结果成功从Hela细胞RNA中扩增出1.56kb Ro60,所克隆的Ro60 cDNA与已公布的序列完全符合,证明本克隆为Ro60 cDNA的精确拷贝,并证实其目的基因与重组载体发生了特异转座和病毒重组,成功地构建了重组杆状病毒表达载体Bacmid-Ro60.结论本实验成功克隆了Ro60 cDNA并构建了其杆状病毒表达载体,为进一步表达Ro60蛋白和研究此抗原在红斑狼疮的发病机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建中	北京大学人民医院皮肤科	340	1152	15.0	22.0
2	郭利劭	北京大学人民医院皮肤科	6	31	2.0	5.0