地高辛标记的cDNA探针检测烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒及马铃薯Y病毒

• 作者: 周广和 杜国英 王锡锋
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: TMV CMV PVY 地高辛标记探针 斑点杂交
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 植物病害及其防治
• 页码范围: 75-79
• 页数: 5页
• 分类号: S432.41
• 字数: 3142字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-0914.2004.01.013

摘要

根据已发表的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计特异引物,分别以提取的TMV、CMV和PVY侵染的病叶总RNA为模板,反转录PCR进行体外扩增,分别得到长度为0.44、0.77、0.80kb的目的片段,并克隆到pGEM-T easy质粒载体上,以构建的重组质粒为模板,用PCR方法合成了相应的地高辛标记的双链DNA探针.以合成的探针通过斑点杂交技术检测烟草病叶总RNA和烟草病叶汁液.TMV、CMV和PVY的3种地高辛探针检测各自感染的烟草病叶总RNA的稀释低限分别为1:1 000、1:10 000、1:320,检测各自侵染烟草病汁液的最大稀释倍数分别为1:100、1:100、1:10,而每种探针与健康烟草和其它2种病毒的反应均为阴性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周广和	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	19	288	11.0	16.0
2	王锡锋	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	44	383	12.0	17.0
3	杜国英	中国海洋大学生命科学学院	7	77	3.0	7.0