NF-κB decoy寡核苷酸增强阿霉素对肝癌耐药细胞株HepG2/ADM化疗敏感性的研究

• 作者: 严斌 兰明银 张万广 陈孝平
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 关键词: 癌,肝细胞 NF-κB decoy寡核苷酸 耐药
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 691-695
• 页数: 5页
• 字数: 4388字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2004.10.014

摘要

目的研究NF-κB decoy寡核苷酸增强肝癌耐药细胞株HepG2/ADM对阿霉素化疗敏感性的变化.方法通过培养液中阿霉素 (adriamycin,ADM)的浓度梯度增加法,长期筛选培养,建立肝癌HepG2/ADM耐药细胞株, 荧光定量PCR检测MDR1的表达,转染FITC标记的NF-κB decoy寡核苷酸,通过荧光显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位的观察,凝胶迁移率实验检测转染前后NF-κB结合活性的变化,加入化疗药物阿霉素(ADM),MTT比色法检测细胞增殖,细胞凋亡采用流式细胞仪和TUNEL法检测观察转染NF-κB decoy寡核苷酸后肝癌耐药细胞对化疗药物的敏感性变化.结果 HepG2/ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型,转染荧光标记的NF-κB decoy寡核苷酸1 h,倒置荧光显微镜和共聚焦显微镜显示定位于细胞核内,凝胶阻滞分析实验(electrophoreretic mobility shift assay, EMSA)分析示NF-κB decoy寡核苷酸能够降低NF-κB核内结合,加入化疗ADM(0.1 mg/L)后,MTT显示HepG2/ADM细胞的增殖明显抑制,ADM作用24 h后出现细胞凋亡,流式细胞术、TUNEL法检测NF-κB decoy寡核苷酸转染HepG2/ADM 细胞诱导的凋亡,与对照组相比,凋亡指数增加.结论 NF-κB decoy寡核苷酸转染肝癌耐药细胞株HepG2/ADM后,能够抑制NF-κB的激活,逆转耐药细胞对化疗药物的耐受,增加其对化疗药物的敏感性.