TRP-1编码基因反义核酸对黑素细胞增殖及功能的影响

• 作者: 刘玉峰 孙东杰 李廷慧 李强 李春英 高天文 高鸽
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤 RNA,反义 黑素细胞 酪氨酸酶相关蛋白1
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 68-70
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2004.02.002

摘要

目的构建酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)反义真核表达载体并转染TRP-1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,进一步研究其对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞增殖及功能的影响.方法将TRP-1基因反向亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,转染黑素细胞及恶性黑素瘤细胞.以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRP-1 mRNA水平的变化,免疫印迹法检测TRP-1蛋白水平的改变.通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,并用L-多巴测定酪氨酸酶活性的改变.结果成功构建重组反义表达载体pcDNA3.1/TRP-1(-),转染细胞稳定表达TRP-1反义核酸.RT-PCR提示TRP-1 mRNA水平显著下降,免疫印迹提示其TRP-1蛋白表达水平降低.流式细胞检测表明反义TRP-1转染细胞发生细胞周期G1期阻滞.转染组黑素细胞及黑素瘤细胞酪氨酸酶活性抑制率分别达46%和54%.结论TRP-1在黑素细胞及黑素瘤细胞的增殖及功能方面发挥重要作用,TRP-1反义核酸转染细胞细胞周期受到阻滞,酪氨酸酶活性明显降低.