含RGD序列的山蛭素突变体的克隆、表达及性质研究

• 作者: 杨江峰 茹炳根 赵菁菁
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 山蛭素 RGD 凝血酶抑制剂 抗凝剂
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1125-1133
• 页数: 9页
• 分类号: Q816
• 字数: 5662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2004.12.014

摘要

根据LAP(leech antihemostatic protein)理论,在分析山蛭素和decorsin结构特征的基础上,利用重组PCR方法,删除了山蛭素氨基酸序列的33位至35位,同时分别插入了RGDS和来源于decorsin的一段PRGDADP序列构建成为2种含RGD序列的山蛭素突变体,分别命名为HRGD1和HRGD2.这2种突变体在毕赤酵母菌株GS115中得到成功表达.经过超滤、阳离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化步骤之后,得到纯度高于95%的目的蛋白.通过以chromozym TH为底物的凝血酶酰胺水解实验和血小板聚集抑制实验证实了其体外生物学活性,HRGD1和HRGD2抑制凝血酶的动力学常数达到10-13mol/L水平,抑制血小板的IC50在10-6mol/L水平上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	茹炳根	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	102	1233	20.0	29.0
2	赵菁菁	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	2	1	1.0	1.0
3	杨江峰	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	1	0	0.0	0.0