检测人血清中SARS冠状病毒IgG抗体的ELISA方法建立及其应用

• 作者: 严汉民 刘中华 崔爱利 张建 张燕 朱贞 杨建国 毛乃颖 蒋小泓 许文波 阮力 陈彪
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 严重急性呼吸综合征(SARS) 冠状病毒 N蛋白 ELISA
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 病毒学诊断
• 页码范围: 73-78
• 页数: 6页
• 分类号: R563.8|R373.9
• 字数: 5485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2004.01.014

摘要

为了建立方便、敏感和特异的SARS病毒血清学诊断方法,利用PQE30表达系统在大肠杆菌M15中分段高效表达了SARS病毒N蛋白.通过金属鏊合亲和层析纯化了目的蛋白N-1和N-2,Western blot结果显示,两个表达蛋白均具有较好的抗原性.然后将N-1和N-2蛋白共同包被,建立了检测人血清中SARS病毒IgG抗体的间接ELISA法.用此方法检测120例临床诊断为SARS的病人和244个不同年龄组正常人血清IgG抗体,结果120例SARS病人的第一份血清IgG抗体总阳性率为60.0%,发病第0～7、8～10、11～14、15～27和28天后的血清中,SARS病毒IgG抗体阳性率分别为0、11.1%、60.0%、60.5%和70.3%;而244份正常人血清检测结果均为阴性,包括100份14岁以下儿童血清也未发现假阳性.结果表明,利用大肠杆菌表达的N蛋白完全能够替代全病毒灭活抗原,所建立的间接ELISA方法简单,价格低廉,能保证生物安全,对SARS可疑病例的确诊和排除具有重要的实际应用价值,可用于SARS高危人群的血清流行病学监测,SARS疫情的控制和预防,以及SARS病毒蛋白功能的研究.