猪乳中一高分子量蛋白质的分离纯化和鉴定

• 作者: 丁益 张海方 秦宜德 邹思湘
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪乳 高分子量蛋白质 纯化 鉴定
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 67-73
• 页数: 7页
• 分类号: Q51|S282
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2004.01.017

摘要

对猪乳中一高分子量蛋白(HMWP)进行了分离纯化,并对其某些生化性质进行了鉴定.猪乳通过去脂得到脱脂乳,再去除酪蛋白得到乳清.对乳清进行硫酸铵分级盐析,猪乳中HMWP在40%饱和度硫酸铵盐析下有最大沉淀.收集40 %饱和度硫酸铵盐析沉淀,经过溶解、透析得到HMWP的粗品.通过Mono Q离子交换柱,对其粗品进行两次层析提纯,得到了HMWP纯品,其纯度和得率分别为97.85 %和12.31 %.多种植物凝集素的Western blotting鉴定表明,HMWP是一个糖基种类较少的糖蛋白,含有Man和GlcNAc.SDS-PAGE和凝胶过滤分别测得HMWP的分子量为114.8 kD和115.0 kD.通过等电点测定,HMWP的pI为5.10.HMWP的氨基酸组分分析得知,其富含Asp、Glu、Gly和Cys,疏水性氨基酸较低,仅占15.59 %摩尔分数.这些结果说明HMWP是一个易溶于水的、酸性的分泌性单体球蛋白.N端氨基酸序列测定结果为Ala-Leu-Val-Gln-Ser-Gly-Leu-Asn-Leu-Val,通过从网络Genbank 检索没有发现其同源蛋白的序列,说明其可能是一个新蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹思湘	南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室	133	1407	20.0	27.0
2	秦宜德	安徽医科大学生物化学与分子生物学实验室	70	493	11.0	19.0
6	张海方	南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室	5	15	2.0	3.0