SARS冠状病毒单克隆抗体制备及在肺尸检标本染色中的应用

• 作者: 倪安平 卢朝辉 许慧 陈杰
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体,单克隆 核壳蛋白质类 冠状病毒科
• 年，卷（期）: 2004,（21）
• 所属期刊栏目: 临床论著
• 页码范围: 1810-1813
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 3537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2004.21.013

摘要

目的制备抗SARS冠状病毒的单克隆抗体,用于SARS的实验室诊断.方法灭活SARS冠状病毒(PUMC01)全病毒免疫BALB/C小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(NS-1)融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光法(IFA)及免疫印迹法对所获得的细胞克隆进行筛选和鉴定,并用其中一株(M2)杂交瘤诱生的腹水单克隆抗体对SARS患者尸检肺组织切片进行免疫组织化学染色. 结果共筛选出6株杂交瘤细胞,ELISA及IFA法证实其分泌的单克隆抗体与SARS冠状病毒有特异性反应,与其他常见呼吸道病原体均无交叉反应.免疫双扩散方法鉴定1株杂交瘤细胞(M2)为免疫球蛋白IgG3型,其余5株均为IgG1型.免疫印迹试验显示1株杂交瘤细胞(M2)分泌的抗体与相对分子质量68 000的蛋白有特异性反应;4株杂交瘤细胞分泌的抗体与相对分子质量27 000的蛋白有特异性反应,1株在免疫印迹上未见到结果.SARS患者尸检肺组织病理切片免疫组织化学染色阳性,在肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞及巨噬细胞的胞浆均可见阳性颗粒.结论我们制备的6株单克隆抗体是抗SARS冠状病毒的特异性单克隆抗体,用于SARS尸检肺组织免疫组化染色,结果阳性.