在昆虫细胞中表达能自聚成病毒样颗粒的兔出血症病毒衣壳蛋白

• 作者: 严维巍 崔治中 王永坤
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 衣壳蛋白VP60基因 重组杆状病毒 表达 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 333-337
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3358字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2004.04.008

摘要

将兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因插入杆状病毒转移载体pBLUEBAC 4,获得重组转移载体pBLUEBAC4-VP60.在脂质体转染试剂介导下,将重组杆状病毒转移载体pBLUEBAC4-VP60 与线性化的野生型杆状病毒基因组DNA共转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,经过三轮蚀斑纯化后,获得了克隆化的重组杆状病毒pBLUEBAC4-VP60.以重组杆状病毒感染Sf9细胞后,收获细胞培养上清和细胞裂解液上清,SDS-PAGE电泳分析显示,重组病毒pBLUEBAC4-VP60表达一分子量各为60kD左右的特异性重组蛋白,并且该重组蛋白经Western blot检测,皆可被兔抗RHDV高免血清所识别,表明VP60蛋白基因在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中得到了表达,并且具有与天然VP60相似的抗原性.血凝试验表明,表达的重组蛋白具有血凝特性,可以凝集人"O"型红细胞,血凝价为213.同时,该血凝性可被抗RHDV的高免血清所抑制.经电镜观察,重组病毒表达的衣壳蛋白可以在没有其他任何成分存在的条件下,在昆虫细胞内也能自然聚合成不包裹核酸的、与天然RHDV病毒粒子在物理形态上类似的病毒样颗粒(VLPs).在与兔抗RHDV高免血清37℃作用1h后,该病毒样颗粒于电镜下观察可出现凝集成团的现象,表明该VLPs与天然RHDV在抗原性上也极为相似.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔治中	山东农业大学动物科技系	339	5341	37.0	59.0
2	王永坤	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	92	1155	21.0	31.0
3	严维巍	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	25	571	15.0	23.0