大鼠血管纹边缘细胞的原代培养及IsK的表达

• 作者: 孔维佳 李隽 陈敏
• 来源期刊: 中国听力语言康复科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 边缘细胞 原代培养 细胞角蛋白18 波形蛋白 IsK 大鼠
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: R764
• 字数: 4577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4933.2004.02.003

摘要

目的为进一步研究内淋巴生成的可能机制以及影响因素,提供可供研究的大量实验材料-边缘细胞(marginal cell,MC),建立大鼠来源的MC的原代培养体系.方法利用大鼠耳蜗的侧壁组织作为组织块种檀培养.从第2天开始每日倒置显微镜观察,选特征性的表现照相.经选择性消化、差异性贴壁等方法抑制FLC生长,纯化MC.经过MC的形态、生长特征的观察;细胞角蛋白18、波形蛋白的免疫细胞化学;扫描及透射电镜;RT-PCR检测IsK蛋白mRNA的表达等方法鉴定MC.结果新鲜组织块淡黄、透明,可见丰富的毛细血管网;但血管纹结构致密,倒置显微镜下不易分辨不同细胞的轮廓.MC从组织块迁移出来多在培养第2天,呈多角形外观、核大而圆、颜色较暗淡,细胞之间连接紧密,形成上皮单层时呈"铺路石样"外观.FLC呈梭形,呈"鱼群样"包绕MC生长,增殖速度快于MC.由纯化的MC构成的上皮单层表面可见由成百上千个MC包绕液体而成的dome,这提示MC净向的跨上皮转运功能.原代MC表达细胞角蛋白和波形蛋白,微绒毛丰富、细胞间连接提示其上皮起源.IsK蛋白mRNA的表达证实了培养上皮细胞的MC起源.结论离体培养的耳蜗边缘细胞具有与其在体相同的形态及生理特征.MC原代培养体系的建立,可为进一步探讨边缘细胞的生理功能及某些内耳疾病的病理机制提供良好的研究材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔维佳	华中科技大学同济医学院协和医院耳鼻咽喉科	278	1805	21.0	28.0
2	陈敏	华中科技大学同济医学院协和医院耳鼻咽喉科	290	2590	26.0	39.0
3	李隽	华中科技大学同济医学院协和医院耳鼻咽喉科	6	30	3.0	5.0