烧伤患者血清与痂下水肿液诱导内皮细胞凋亡的实验研究

• 作者: 张丕红 杨兴华 梁鹏飞 黄晓元
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 烧伤 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 内皮细胞
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 烧伤后早期损害
• 页码范围: 275-277
• 页数: 3页
• 分类号: R6
• 字数: 2184字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2004.05.007

摘要

目的探讨烧伤患者血清(以下称烧伤血清)、痂下水肿液诱导人脐静脉血管内皮细胞株ECV304凋亡的分子机制. 方法将体外培养的ECV304随机分为:A组,用含体积分数30%正常人血清的培养基培养;B、C组,分别用含烧伤血清、痂下水肿液(体积分数同A组)的培养基培养.6、12、24、36 h后采用Hochest 33258荧光染色观察3组细胞核形态学改变,并计算细胞凋亡百分率.培养12 h后采用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)检测试剂盒测定caspase-3、8、9的活化情况.培养12、24 h后进行琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡的特征性DNA梯状条带. 结果 A组各时相点下可见胞核呈弥散均匀荧光,B、C组细胞培养24 h后胞核呈现深染、致密的颗粒块状荧光.培养12～36 h B、C组的凋亡百分率均高于A组(P<0.01),其中36 h时B、C组的凋亡百分率分别为(38.9±7.3)%、(49.5±6.5)%,明显高于A组(2.2±0.3)%(P<0.01).B、C组培养12 h后caspase-3、8、9活性均高于A组(P<0.01).B、C组DNA琼脂糖电泳出现明显梯状条带,A组未见此现象. 结论烧伤血清、痂下水肿液通过同时激活死亡受体信号通路和线粒体信号通路导致ECV304细胞凋亡.