经CR2激活MAPKs与抑制HIV-gp160处理的CD4+细胞增殖

• 作者: H.Stoiber M.P.Dierich 李太存 罗敏华 苏先狮 陈明亮
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 补体受体(CR2) 信号传导 丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs) HIV CD4+细胞缺损
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 304-310
• 页数: 7页
• 分类号: R392
• 字数: 5533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.04.017

摘要

目的建立CR2稳定表达的HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系,研究细胞中MAPKs的活化和细胞增殖变化,阐明经CR2的信号传导、CR2的表达对HIV-gp160等所致的CD4+细胞的影响.方法用哺乳动物细胞稳定转染法建立稳定表达CR2的HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系,细胞经磁珠阳性纯化后,用FACS和Western blot对CR2的表达进行鉴定.用PMA、10% NHS、HIV-gp160等处理细胞后,经Western blot检测细胞的MAPKs的活化水平;用Cell Titer 96 Aqueous One Solution Reagent检测和分析处理后细胞的增殖差异.结果 FACS检测和统计学方法分析结果表明CR2表达的阳性率高达96%以上;Western blot结果显示所建HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系的CR2的表达水平与Raji细胞相近;细胞经PMA、预先激活补体的10% NHS处理细胞,发现在处理10 min时ERK、JNK、P38的活化达高峰;PD98059、Wortmanin和抗-CR2能阻断ERK、JNK、P38的活化.HIV-gp160、预先激活补体的10% NHS能相应激活HOS-CR2, HOS-CD4 和HOS-CD4CR2细胞ERK、JNK、P38,这些激活均可被相应的抗体所阻断;细胞增殖实验结果显示HIV-gp160能抑制细胞增殖(P＜0.01),CR2的表达能加重HIV-gp160所致的细胞增殖抑制(P＜0.01).结论磁珠阳性纯化法可浓集稳定表达靶基因的细胞,提高阳性率和表达水平.刺激因素可经由CR2激活MAPKs,CR2的表达促进HIV-gp160所诱导的细胞死亡,与HIV感染所致的CD4+细胞缺损密切相关,CD4+细胞缺失机制的阐明将有助于AIDS致病机制和防治策略的研究.